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Comité Científico Scientific Committee
NIVELES DE TIORREDOXINA PLASMÁTICA EN INDIVIDUOS SANOS ADULTOS.
Pilar Muñiz PhD1, 2, Mónica Cavia BS.1, Celia Guerrero BS1, Silvia Ruiz-Crespo BS1, Marta Herreros BS. PhD1, María Jesús Coma MD. PhD1.
1Unidad de Investigación del Hospital General Yagüe. Complejo Asistencial Universitario de Burgos.
2Departamento de Bioquímica y Biología Molecular. Universidad de Burgos.
Burgos. España
cavia @ hgy.es
Rev Electron Biomed / Electron J Biomed 2010;2:12-17.
Comentario del revisor Silvia Albillos García PhD. Investigadora postdoctoral Instituto de Biotecnología de León (INBIOTEC). León. España
Comentario del revisor Victoria Valls Bellés PhD. Investigadora del Departamento de Pediatría, Ginecología y Obstreticia de la Universidad de Valencia. Valencia. España.
RESUMEN:
OBJETIVO: Conocer los niveles plasmáticos normales de tiorredoxina en individuos sanos, en población adulta.
MATERIAL Y MÉTODOS: Se seleccionó una muestra de individuos sanos adultos, cuyo estado de salud se presumió por ser donantes de sangre habituales, que acudieron voluntariamente a la hemodonación rutinaria. Un total de 49 donantes aceptaron la participación de modo voluntario y firmaron el consentimiento informado.
La determinación de la tiorredoxina (Trx) se realizó en los laboratorios de la Unidad de Investigación del Complejo Asistencial Universitario de Burgos, mediante la técnica de ELISA.
Se revisó la literatura mediante búsquedas en Medline (PubMed) de publicaciones científicas posteriores al año 2000, en los que los respectivos trabajos hubieran incluído una muestra de individuos sanos adultos.
RESULTADOS: Los valores de tiorredoxina plasmática obtenidos en nuestra serie, mostraron una gran variabilidad entre individuos: la media fue de 31,37 ng/ml, la desviación de ± 10,87 con un rango de 12,25 a 50,77 ng/ml. El porcentaje de variación (CV) fue de 34,6% y el rango intercuartil de 22,77 a 38,88 ng/ml.
Se analizan y comparan estos resultados con los que han sido previamente publicados en un total de siete series, correspondientes a sujetos sanos utilizados como controles de diversos estudios caso-control. La mayoría corresponde a series muy cortas, que mostraron una variación entre medias muy amplia.
PALABRAS CLAVE: Tiorredoxina. Donantes sangre. Estrés Oxidativo.
SUMMARY: PLASMATIC THIOREDOXIN LEVELS IN HEALTHY INDIVIDUALS.
OBJECTIVE: Evaluation of normal plasma levels of thioredoxin in a healthy adult population.
MATERIAL AND METHODS: The blood were collected from 49 healthy adult persons, whose health was assumed because the persons are regular blood donors. The participation was voluntary and the informed written consent was obtained for all persons.
The assay of thioredoxin (Trx) was carried out in the Research Unit of Complejo Asistencial Universitario de Burgos.
Furthermore, we searched Medline for scientific studies after 2000 year, in which have included a control group of healthy adults.
RESULTS: The results showed a large variability between individuals, in the thioredoxin levels in healthy blood donors. The average obtained was of 31.37±10.87 ng/ml (12.25 - 50.77 ng/ml) and with a percentage of variation (CV) of 34.6% and interquartile range of 22.77 to 38.88 ng/ml.
A total of seven series of thioredoxin values for healthy subjects were obtained of scientific studies and were used as controls for case-control studies. Most were series very short, which showed a wide variation in their average.
KEY WORDS: Thioredoxin. Blood donors. Oxidative Stress.
INTRODUCCIÓN
La tiorredoxina es una proteína tiólica que además de sus propiedades antioxidantes también promueve el crecimiento celular, inhibe la apoptosis y modula un número importante de procesos inflamatorios1, 2. Es excretada al exterior celular3 donde interactúa con otros factores que estimulan el crecimiento celular e intervienen en funciones de regulación de la inmunidad4. Cada vez son más los trabajos de investigación que muestan un papel de la Trx en distintas patologías. Esto hace necesario establecer unos valores de refencia que puedan ser utilizados como control en diferentes patologías.
En base a esto, el objetivo de este trabajo fue evaluar los niveles de Trx en plasma de una población de donantes de Burgos y compararlo con datos publicados por otros autores.
MATERIAL Y MÉTODOS
El estudio se realizó con sangre de 49 donantes habituales, reclutados consecutivamente en horario vespertino, que aceptaron voluntariamente participar en el estudio y que firmaron el consentimiento después de ser informados sobre el objetivo del estudio a realizar.
A los donantes se les extrajo una sola y única muestra de sange para la realización del estudio en el centro de Hemodonación del Complejo Asistencial Universitario de Burgos, ubicado en el Hospital Divino Valles de Burgos. Se recogió la muestra de sangre en tubos heparinizados y se centrifugó a 8000 rpm durante 6 minutos para la obtención de plasma, se recogió y se mantuvieron guardados a -80ºC hasta su análisis.
Para la determinación de la concentración de tiorredoxina se empleó un kit de ELISA, basado en el procedimiento desarrollado por Kogaki5 y Nakamura6, el cual emplea dos diferentes anticuerpos monoclonales contra dos diferentes epítopos de la tiorredoxina humana. Por otra parte, estos anticuerpos no son capaces de reconocer la tiorredoxina mitocondrial ni la tiorredoxina de origen no humana, lo que por tanto les confiere una muy alta especificidad.
El Kit de ELISA fue adquirido en Ebisu Build, Shimotsutsumi-cho, Kawabata Marutamachi, Sakyo-ku, Kyoto 606-8396, Japan. Para las determinaciones, se utilizaron 220 µL de muestra de plasma diluidos 1:10, y la lectura se realizó a 450 nm, obteniendo la concentración de tiorredoxina en ng/ml presente en plasma por interpolación con el resultado a una curva patrón obtenido a partir de los estándares de reacción.
RESULTADOS
Nuestro estudio fue realizado en donantes de sangre como muestra de población sana y asintomática con el objetivo de establecer un control frente a diferentes patologías. En la Tabla 1 se resumen las características poblaciones, con una media de 55 años de edad.
En los parámetros analizados no se observó ninguna patología en nuestro grupo de donantes, con la excepción de los valores de lipidemia que estaban elevados en el 32% de los sujetos. Las proteínas totales así como la hemoglobina se encontró dentro de los rangos normales.
Los resultados sobre los niveles de tiorredoxina plasmática en este grupo de donantes, mostraron una gran variabilidad entre individuos: rango 12,25-50,77; media de 31,37 ng/ml, desviación del ± 10,87; y porcentaje de variación (CV) 34,6% y con un rango intercuartil de 22,77-38,88 ng/ml.
En la revisión bibliográfica selecionamos publicaciones accesibles a través de la base de datos PubMed, sobre trabajos de investigación sobre poblaciones o tratamientos con diferentes patologías, que utilizarón para comparar una muestra de control correspondiente a una poblacion de individuos sanos adultos y presentaron los resultados como media ± desviación (tabla 2) o bien, en caso de ser una población de pequeño tamaño, como mediana con sus rangos intercuartil (tabla 3).
En la tabla 2 vemos que los tamaños poblacionales utilizados en los distintos trabajos varían desde 9 a 81 individuos sanos, cuyas medias no difieren mucho entre sí, con valores de 28 y 24,4 ng/ml respectivamente. Los niveles más altos de tiorredoxina para un grupo control. Los niveles más altos de tiorredoxina para un grupo control son los presentados por Jikimoto9 en 2002 con valores de 38,6 ± 18,5 ng/ml. Los resultados obtenidos en nuestra población, no difieren sustancialmente de los obtenidos por otros autores.
grupos control de individuos sanos8-15
Algunos autores presentan sus resultados como mediana e igualmente se observa que los resultados varían entre unos y otros autores, tal y como se muestra en la tabla 3, donde los valores oscilan entre valores de 18 y 49,5 ng/ml.
DISCUSIÓN:
La gran variabilidad existente en la literatura, en relación a los niveles de tiorredoxina plasmática en grupos control hace necesarios estudios que permitan establecer unos valores de referencia.
Además de la variabildiad, la mayoría de los trabajos aquí citados utilizan series muy cortas, lo que en algunos casos no permite el análisis de medias, sino que se expresan en cuartiles con el objetivo de obtener una descripción lo más certera de los resultados obtenidos. En este sentido, es también llamativa la dispersión de los valores que muestran los diferentes autores.
Excluyendo la serie de Nakamura y col.7 nuestra serie, con 49 pacientes, es la más larga de cuantas han sido recientemente publicadas. El método empleado en nuestro estudio, en general, es el más utilizado para la determinación de Trx plasmática, lo cual nos permite una comparación con los resultados obtenidos por otros autores.
Estos resultados permiten concluir que los valores basales obtenidos en los controles de diversas series de pacientes sanos adultos, presentan una variabilidad no explicada actualmente. Los resultados que han sido obtenidos en nuestro laboratorio, a pesar de la gran dispersión obtenida en nuestro grupo de donantes, están entre los rangos obtenidos por otros autores.
REFERENCIAS
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AGRADECIMIENTOS:
Al Servicio de Hematología y Hemoterapia, por su colaboración en el Banco de Sangre y las continuas facilidades que nos han dado.
Trabajo realizado con ayuda de Caja de Burgos, y la Gerencia Regional de Salud (SACyL)
CORRESPONDENCIA:
Mónica Cavia
Unidad de Investigación
Hospital General Yagüe
Burgos. España.
Email: cavia @ hgy.es